Enzim, ATP'ye bağlı bir reaksiyonda çeşitli RNA substratlarının 3′-terminal fosfatını 2 ′, 3′-siklik fosfodiestere dönüştürür. Kataliz, enzimin ATP tarafından aktivasyonundan başlayarak, adenilat ve bir histidin artığı arasında bir fosforamid bağı oluşturan üç aşamalı bir mekanizma ile gerçekleşir [5,6]. Adenilat grubu daha sonra substratın 3′-fosfat ucuna aktarılır ve başlıklı yapı [RNA] -3 ′ - (5′-difosfoadenosin) oluşturulur. Son olarak enzim, 2 vic-fosfor üzerindeki komşu O-3 ′ saldırısını katalize eder, bu da siklik fosfat oluşumu ve adenilat salımı ile sonuçlanır. Enzim ayrıca bir polinükleotid 5 ′ adenilasyon aktivitesine sahiptir [7].? Cf. EC a 6.5.1.5, RNA 3p-terminal-fosfat siklaz (GTP).
